新型冠狀病毒傳染性極強(qiáng)，滅活病毒再進(jìn)行檢測(cè)以確保臨檢人員安全，已經(jīng)成為許多一線臨床檢測(cè)單位要求的必不可少的步驟。
對(duì)冠狀病毒理化特性的認(rèn)識(shí)多來自對(duì)SARS-CoV和MERS-CoV的研究。病毒對(duì)紫外線和熱敏感，56℃30分鐘、乙醚、75%乙醇、含氯消毒劑、過氧乙酸和氯仿等脂溶劑均可有效滅活病毒，氯已定不能有效滅活病毒[1]。
國(guó)家衛(wèi)健委頒發(fā)的《新型冠狀病毒肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南（第四版）》也涉及滅活材料的操作：“感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后進(jìn)行的核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)、生化分析等操作應(yīng)當(dāng)在生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行”[2]。
中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì)發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測(cè)專家共識(shí)》中，明確指出需將樣品56℃孵育至少45分鐘或更高溫度進(jìn)行滅活[3]。
然而，以熒光定量RT-PCR作為檢測(cè)手段的新冠病毒檢測(cè)的陽性率目前僅有30~50%，導(dǎo)致奇高的假陰性率[4]。假陰性不僅會(huì)導(dǎo)致疑似患者不能快速確診，而且會(huì)使漏檢者成為潛在的病毒傳染源，提高新冠病毒核酸檢出率十分迫切。假陰性發(fā)生的原因很多，而擴(kuò)增模板的質(zhì)量應(yīng)該是需要考慮的重要因素之一。
01 2月19日，中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院陳培松等，在中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志發(fā)表的研究論文《不同方式滅活口咽拭子標(biāo)本對(duì)2019新型冠狀病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果的影響》中指出使用56℃30min和75%乙醇處理咽拭子標(biāo)本，對(duì)后續(xù)2019新型冠狀病毒核酸qPCR檢測(cè)均無明顯的影響。[5] 而論文中也指出檢測(cè)的兩例陽性標(biāo)本，CT值均比較高（未稀釋時(shí)，分別為19和24），對(duì)于某些CT值偏低的標(biāo)本，是否存在同樣的相關(guān)性，仍需要進(jìn)一步探討。
02 2月20日，南京大學(xué)模式動(dòng)物研究員張沁欣等，在ChinaXiv發(fā)表的《病毒核酸提取前的高溫滅活過程顯著降低可檢出病毒核酸模板量》論文以豬PDEV冠狀病毒（疫苗）作為模型研究了高溫滅活過程對(duì)病毒核酸完整性的影響，研究確認(rèn)高溫滅活確實(shí)影響了新冠病毒核酸的完整性，導(dǎo)致病毒核酸的可檢出量顯著下降[6]。
03 近期，浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科段秀枝等人，在《病毒滅活處理對(duì)2019新型冠狀病毒核酸檢測(cè)弱陽性結(jié)果的影響》的論文中對(duì)鼻咽拭子陽性標(biāo)本進(jìn)行56℃30min水浴、56℃60min和60℃30min3組滅活方式，并確認(rèn)病毒滅活處理會(huì)使新型冠狀病毒核酸降解，導(dǎo)致檢測(cè)Ct值降低，使低濃度標(biāo)本出現(xiàn)假陰性結(jié)果[7]。 此研究建議各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)驗(yàn)室自身情況，做好各實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)下2019新型冠狀病毒滅活前后的檢測(cè)評(píng)估，慎重選擇是否進(jìn)行檢測(cè)前滅活及選擇合理的滅活方式，避免漏檢造成的潛在病毒傳染源。
標(biāo)本滅活處理的方式會(huì)使新型冠狀病毒核酸降解，雖然對(duì)高濃度標(biāo)本造成的影響較小，但對(duì)低濃度的標(biāo)本影響極大，容易導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。而采用病毒滅活保存液替代常規(guī)保存液，既可以保證病毒被滅活確保了一線臨檢人員安全，又保護(hù)病毒不因滅活步驟降低核酸的完整性，確保樣本被完整檢出，避免或減少假陰性的產(chǎn)生。
蛋白變性劑能裂解細(xì)胞以及病毒，滅活病毒并釋放其核酸；同時(shí)抑制RNA酶和DNA酶活性，有效保護(hù)核酸的穩(wěn)定性。 適用于咽拭子、痰液及其它呼吸道標(biāo)本的保存及運(yùn)輸。 可配合一起使用的檢測(cè)試劑包括：13種呼吸道病原體多重檢測(cè)試劑盒（國(guó)械注準(zhǔn)20183400518）、其他常見的呼吸道病原體核酸檢測(cè)產(chǎn)品和新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測(cè)試劑。
產(chǎn)品信息
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 備案號(hào) | 貨號(hào) |
| 樣本保存液 | 50管/盒 | 浙甬械備20200010號(hào) | XB06013 |
公司介紹
1. 國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)辦公廳國(guó)家中醫(yī)藥管理局辦公室. 新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）國(guó)衛(wèi)辦醫(yī)函[2020]184號(hào). 2020: 2020年3月3日. 2. 中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì). 新型冠狀病毒肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南（第四版）. 2020: 2020年2月6日. 3. 中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)分會(huì). 2020. 新型冠狀病毒肺炎病毒核酸檢測(cè)專家共識(shí). 中華醫(yī)學(xué)雜志. 100( 00 ): E003-E003.DOI:10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2020.0003 4. 2020年2月5日，中國(guó)工程院副院長(zhǎng)、呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)專家王辰教授在中央電視臺(tái)采訪中提到: “核酸檢測(cè)對(duì)于陽性病人，最高有30~50%的陽性率。” 5. 陳培松, 何宇婷, 黃裕立, 等. 不同方式滅活口咽拭子標(biāo)本對(duì)2019新型冠狀病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果的影響[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2020, 43(00):E004-E004.DOI:10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2020.0004 6. 張沁欣, 趙慶順. 病毒核酸提取前的高溫滅活過程顯著降低可檢出病毒核酸模板量[J]. [ChinaXiv:202002.00034],2020. 7. 段秀枝, 王旭楚, 等. 病毒滅活處理對(duì)2019新型冠狀病毒核酸檢測(cè)弱陽性結(jié)果的影響. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)會(huì), 2020, DOI:10.3760/cma.j.cn114452-20200227-00138
